Sigma:蛋白酶 K,P6556-25MG
屬性:
形式:lyophilized powder
質量水平:300
specific activity:≥30 units/mg protein
分子量:28.93 kDa
溶解性:H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless
異質活性:Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid
運輸:wet ice
儲存溫度:?20°C
應用:
P6556產品為凍干粉形式。P6556產品已可用于分解人晶狀體蛋白[1]。蛋白酶K消化的蛋白酶印跡可以揭示蛋白質與蛋白質表面的相互作用。[2]Sigma的該酶已用于雞胚的預雜交。[3]它還被用來富集PrPSc,一種存在于羊、倉鼠和老鼠癢病樣本中的朊病毒蛋白。[4]
在分離DNA和RNA的過程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除內毒素結合的陽離子蛋白,如溶jun酶和核糖核酸酶A。
據報道,其可用于分離肝、酵母和綠豆線粒體
用于測定酶在細胞膜上的定位
用于石蠟包埋組織切片的處理,暴露用于抗體標記的抗原結合位點。
用于可傳播海綿狀腦病(TSE)研究中朊病毒腦組織樣本蛋白的消化。
在分離DNA和RNA的過程中,蛋白酶K對核酸酶的蛋白水解失活起作用。
它被用于去除內毒素結合的陽離子蛋白,如溶jun酶和核糖核酸酶A。
它可用于分離肝、酵母和綠豆線粒體
,并用于測定酶在細胞膜上的定位
用于石蠟包埋組織切片的處理,暴露用于抗體標記的抗原結合位點,并
用于可傳播海綿狀腦病(TSE)研究中朊病毒腦組織樣本蛋白的消化。 P6556產品為凍干粉形式。 P6556產品已可用于分解人晶狀體蛋白[1]。
生化/生理作用:
蛋白酶K具有廣泛的特異性,即使在天然狀態下也能降解許多蛋白質。它主要裂解脂肪族和芳香族氨基酸羧基附近的含有封閉α-氨基的肽鍵。[4][5][6]最佳pH值在7.5-9.0之間,等電點為8.9,其活性激活需要[4] Ca2+ (1-5 mM)。蛋白酶K可被二異丙基氟磷酸(DFIP)和苯甲huang酰氟(PMSF)抑制。[5]
蛋白酶K是一種穩定且具有高活性的絲an酸蛋白酶。晶體和分子結構研究證據表明該酶屬于枯草素家族,具有活性位點催化三聯體(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列廣泛的環境中均穩定:pH,緩沖鹽,去污劑(SDS)以及溫度。 在0.1-0.5% SDS存在的情況下,蛋白酶K可保持活性,在不損害分離DNA完整性的前提下,可以消化DNA制劑中的多種蛋白質和核酸酶。
單位定義:
一單位在37°C、pH 7.5條件下每分鐘可水解尿素變性血紅蛋白而產生相當于1.0μmole(181 μg)的酪an酸顯色(福林酚試劑顯色)。
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