Sigma：DNase I，DN25-10MG
屬性：
形式：lyophilized powder
質量水平：300
specific activity：≥400 Kunitz units/mg protein
分子量：~31 kDa
組成：Protein, ≥85%
溶解性：0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy
application(s)：diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing
異質活性：RNase ≤0.02%
運輸：wet ice
儲存溫度：?20°C
一般描述：
DNase I（脫氧核糖核酸酶I）是一種從牛胰腺分離的核酸內切酶。
我們的DNase I可將雙鏈和單鏈DNA酶解成寡核苷酸和單核苷酸。
牛胰腺DNase存在四種異構酶A, B, C和D，均具有不同的等電點：5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式為A，其次為B和C，D所占的比例最小。
DNase I結構類似于核酸外切酶III。其中包括兩個中央β折疊。每個β折疊由六個β-鏈組成。這種復雜的β折疊被大量環形和螺旋形區域包圍。該酶結構類似于核酸外切酶III。[1]
應用：
從原代細胞分離液中去除DNA，在降低粘度的同時提高產量：
將標記堿基摻入DNA：DNA缺口
放射性標記
生物工藝應用：DNA去除
在RT-PCR前從RNA制劑中去除基因組DNA
體外轉錄
缺口平移
DNase足跡
肌動蛋白調控胞內肌動蛋白聚合和細胞凋亡
蛋白質與核酸紫外線交聯
DNase參與調控胞內肌動蛋白聚合，同時參與細胞凋亡過程 [1]
用于從蛋白質樣品中除去 DNA。
生化/生理作用：
DNase I是一種內切核酸酶，可作用于與嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵以產生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。當Mg2+存在時，DNAse I可獨立切割DNA的每條鏈且切割位點是隨機的。當Mn2+存在時，兩條DNA鏈都幾乎是在同樣的位置被切割。[1]二價陽離子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活劑。5 mM濃度的Ca2+可穩定酶免收蛋白水解酶的消化。最適pH在7-8之間。[2]來自牛胰腺的DNAse I由四種色譜可區分的組分A，B，C和D組成，它們的摩爾比分別為4:1:1。僅發現少量D。[3]2-巰基yi醇、螯合劑、十二烷基硫酸鈉（SDS）[4]和肌動蛋白[5]都已知可抑制酶的活性。
特點和優勢：
我們的脫氧核糖核酸酶DNAse I基本屬于不含RNAse產品，支持該產品應用。
單位定義：
一Kunitz單位的酶在以I型或III型DNA作為底物時，在 pH 5.0，37°C的條件下在每mL中每分鐘可引起0.001的A260改變。
外形：
粗制品，含有氯化鈣
制備說明：
溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分裝保存在?20 °C一周后可能會丟失<10%的活性。同樣的溶液保存在2-8 °C則可能丟失約20%的活性。當在pH 5和7之間時，它可在60 °C維持活性最長達五小時，并在68 °C <10分鐘內丟失活性。它在乙酸緩沖液（pH 5.0）和tris緩沖液((pH 7.2)，1 mg/mL濃度)中以6%/小時的速率丟失活性。
分析說明：
通過縮二脲法測定的蛋白質。
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