Sigma:脫氧核糖核酸酶I(牛胰),D4513-1VL,CAS:9003-98-9
屬性:
質量水平:300
無菌性:sterile-filtered
類型:Type II-S
形式:lyophilized powder
specific activity:≥2,000 units/mg protein
分子量:~31 kDa
純化方式:chromatography
組成:Protein, ≥80%
包裝:vial of ≥10.0 mg protein
雜質:endotoxin, tested
溶解性:0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)
特色行業:Diagnostic Assay Manufacturing
Diagnostic Assay Manufacturing
異質活性:Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%
儲存溫度:?20°C
應用:
已有研究采用牛胰腺脫氧核糖核酸酶I,研究了從牛胰腺中提取高活性RNase、DNase、膽固醇酯酶和胰蛋白酶的一個新途徑。牛胰腺脫氧核糖核酸酶I也被用于研究鯉魚肝臟DNase的分離和進一步的特性。
Sigma公司的DNAse I與人類尿液來源的白細胞介素1抑制劑相比,具有水解[14C]DNA [14C]的能力。它也被用來切割139個堿基對Hind III/Nci I限制性片段,以研究該酶用于足跡實驗的穩定性。DNase I被廣泛用作研究藥物和蛋白質與DNA結合的印跡劑。
用于從蛋白質樣品中除去 DNA。
生化/生理作用:
DNase I是一種核酸內切酶,作用于嘧啶附近的磷酸二酯鍵,產生末端為5-磷酸的多核苷酸。在Mg2+存在時,DNAse I對每條DNA鏈進行獨立的裂解,裂解位點是隨機的。在Mn2+存在下,兩條DNA鏈幾乎在同一位點被裂解。其最佳pH值在7到8之間。二價陽離子,如Mn2+、Ca2+、Co2+和Zn2+是該酶的激活劑。濃度為5mM的Ca2+ 可以穩定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四種色譜可分辨組分組成,摩爾比分別為4:1:1。僅發現少量的D。2-巰基yi醇、螯合劑、十二烷基硫酸鈉(SDS) 和肌動蛋白 是已知的抑制該酶活性的物質。
單位定義:
以I型或III型DNA作為底物時,在pH 5.0、37°C條件下,一單位Kunitz 每分鐘可生成0.001/mL的ΔA260。(1單位 = 1 Kunitz單位)
外形:
含氯化鈣的凍干粉
制備說明:
該酶粉可在pH值為4.0-9.0的水中或任何緩沖液中進行復溶,磷酸鹽緩沖液除外。應避免鈣螯合劑的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液,在 ?20°C的溫度下保存一周,其活性可能會降低10%。同樣的溶液分裝儲存在2-8°C中,其活性可降低約20%。它在60°C下,pH值5到7之間可保持活性長達5小時,在68°C時在<10分鐘內失去活性。在醋酸鹽緩沖液(pH 5.0)和tris緩沖液(pH 7.2)中,當濃度為1mg/mL時,其活性以6%/小時的速度喪失。
分析說明
雙縮脲法測定蛋白質。
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