Sigma:辣根過氧化物酶(POD),P8375-1KU,CAS:9003-99-0
屬性:
質量水平:300
類型:Type VI
形式:essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity:≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
分子量:~44 kDa
溶解性:
0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
吸光度比值:RZ 2.5-4.0
特色行業:Diagnostic Assay Manufacturing
儲存溫度:2-8°C
一般描述:
辣根過氧化物酶是從辣根(Amoracia rusticana)中分離出來的,屬于過氧化物酶的鐵原卟啉基團。HRP是含有四個二硫鍵的單鏈多肽。它是一種含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺組成,具體取決于特定同工酶。其分子量(約44 kDa)包括多肽鏈(33,890道爾頓)、氯化血紅素加Ca2+ (約700道爾頓)和碳水化合物(約9,400道爾頓)。至少存在7種HRP同工酶。 辣根過氧化物酶同工酶的等電點范圍為3.0-9.0。
應用:
該酶已用于開發基于熱穩定性大豆過氧化物酶的生物傳感器,通過氧化還原傳導水凝膠將酶交聯并“電連接"到玻璃碳電極上。它還用于測定低密度脂蛋白的氧化。
辣根過氧化物酶(HRP)分離自辣根(紫穗槐),屬于過氧化物酶的鐵原卟啉基團。 它被用作western blot、ELISA和免疫組化等生化應用。 辣根過氧化物酶用于擴增弱信號并提高靶標分子如蛋白的可檢測性。 產品P8375,VI型,是一種基本不含鹽的凍干粉。 它常用于測定溶液中葡萄糖和過氧化物的量。 它已用于研究頸脊髓神經元的感覺輸入。
生化/生理作用:
當與底物一起孵育時,辣根過氧化物酶可產生標記分子的有色、熒光或發光衍生物,從而可實現定量。 辣根過氧化物酶已被證明可略微降低cydAB突變體中的抑制水平。 已知的抑制劑包括die氮化鈉、氰hua物、L-胱氨酸、重鉻酸鹽、亞乙基硫脲、羥胺、硫化物、釩酸鹽、對氨基苯甲酸以及Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+以及Pb2+離子。
HRP易與過氧化氫(H2O2)結合,而所得的[HRP-H2O2]絡合物可氧化各種氫供體。最適pH為6.0-6.5而酶在5.0-9.0的pH范圍內最為穩定。HRP可以通過幾種不同的方法與抗體結合,包括戊二醛,高碘酸鹽氧化,通過二硫鍵,以及通過氨基和巰基定向交聯劑。它比酶標記β-半乳糖苷酶和堿性磷酸酶更小且更穩定,因此是zui理xiang的標記。此外,它的糖基化會導致更低低的非特異性結合。
單位定義:
一個連苯三酚單元將在20℃、pH 6.0條件下,在20秒內從連苯三酚形成1.0mg的紅棓酚。
分析說明:
RZ(Reinheitszahl)是指溶于去離子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血紅素含量的量度,而不是酶活性。 即使是RZ值較高的制劑也可能具有較低的酶活性。
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