Sigma試劑：胰蛋白酶(豬胰),T4799-100G,CAS:9002-07-7
屬性：
生物來源：Porcine pancreas
質量水平：200
產品線：BioReagent
形式：lyophilized powder
specific activity：1,000-2,000 BAEE units/mg solid
分子量：23.8 kDa
濃度：25 mg/mL
應用：cell culture | mammalian: suitable
pH值（酸堿度）：7.6
運輸：ambient
儲存溫度：?20°C
一般描述：
憑借有效的作用和對不同類型細胞的耐受性以及血清誘導的中和作用，胰蛋白酶可用于組織解離。
應用：
來自豬胰腺的胰蛋白酶已被用于消化雞骨頭。它還被用于分離黃體內皮細胞。。
對于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶:肽的使用比例約為1:100至1:20。本品的典型用途是使貼壁細胞從培養表面脫落。 使細胞解離所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養物代數。 Trypsins也被用于細胞培養過程中的細胞再懸浮，在蛋白質組學研究中用于蛋白質的消化，以及在各種凝膠消化中。 其他的應用包括通過基于膜的技術評估結晶，以及在一項研究中確定蛋白質折疊速率和產量可以被動力學陷阱的存在所限制。
包裝：
5, 10, 25, 100, 500 g in poly bottle
生化/生理作用：
胰蛋白酶可切割賴氨酸和精氨酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點的任意一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側，則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑，用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除這些離子會增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）會抑制胰蛋白酶。
組分：
胰蛋白酶是由含223個氨基酸殘基的單鏈多肽組成的，它通過切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽鍵以去除N-末端六肽而獲得。 氨基酸序列通過6個二硫鍵交聯。 這是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser殘基處斷裂，產生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。
注意：
溶于1mM HCl的溶液分裝后可在-20℃穩定保存1年。Ca2+ 的存在也會降低胰蛋白酶的自水解性，保持其在溶液中的穩定性。 胰蛋白酶也將在2.0 M尿素、2.0 M鹽酸胍或0.1% (w/v) SDS中保持大部分活性。
單位定義：
一個BAEE單位以BAEE作為底物，在25°C、pH 7.6條件下每分鐘每毫升產生0.001的ΔA253 。一個BTEE單位=320個ATEE單位。反應體積=3.2mL（1cm的光徑）。
制備說明：
本品為凍干粉，可以25mg/mL溶于Hank′s平衡鹽溶液。
對于需要EDTA的應用，溶解胰蛋白酶應該使用不含Ca2+ 或 Mg2+的緩沖鹽溶液.
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