Sigma試劑:藥典重組胰蛋白酶,T3924-100ML
屬性:
生物來源:Porcine
質量水平:400
無菌性:sterile; sterile-filtered
產品線:BioReagent
形式:solution
分子量:23.4 kDa
濃度:1 ×
應用:cell culture | mammalian: suitable
雜質:Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)
pH值(酸堿度):7.0-9.0
運輸:dry ice
儲存溫度:?20°C
應用:
本品的典型用途是使貼壁細胞從培養表面脫落。 使細胞解離所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養物代數。
生化/生理作用:
胰蛋白酶可切割賴氨酸和精氨酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點的任意一側,則該反應的水解速度減慢,并且如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側,則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑,用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除這些離子會增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑(包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等)會抑制胰蛋白酶。
組分:
胰蛋白酶是由含223個氨基酸殘基的單鏈多肽組成的,它通過切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽鍵以去除N-末端六肽而獲得。 氨基酸序列通過6個二硫鍵交聯。 這是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶,在Lys-Ser殘基處斷裂,產生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。
注意:
本品應置于-10至-40°C環境冷凍儲存。避免反復凍融。
制備說明:
本產品含有酚紅。 由于在干冰上運輸,包裝中可能累積大量二氧化碳。 這些CO2可能會進入溶液并略微降低pH值,使溶液呈橙色而不是粉紅色。 橙色溶液仍然可以使用,或者可以用氫氧化鈉調節pH。 使用高濃度胰蛋白酶長時間孵育細胞,會破壞細胞膜并殺死細胞。 溶解胰蛋白酶或稀釋濃縮胰蛋白酶溶液時,應使用不含Ca2+ 或Mg2+的緩沖鹽溶液。
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