Sigma試劑:藥典重組胰蛋白酶,T8003-100MG,CAS: 9002-07-7
屬性：
質量水平：200
類型：Type I
形式：solid
specific activity：~10,000 BAEE units/mg protein
分子量：23.8 kDa
組成:protein, 90-100%
溶解性：hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
異質活性：Chymotrypsin ≤4 BTEE units/mg protein
運輸：wet ice
儲存溫度：?20°C
應用：對于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用約為 1：100 至 1:20 的比例。從培養表面除去粘附細胞是本產品的一個典型應用。 從其底物中去除細胞所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養物的年齡。 胰蛋白酶也被用于細胞培養期間細胞的再懸浮、蛋白質組學研究中的蛋白質消化和各種凝膠內消化。 其他應用包括：通過基于膜的技術評估結晶，用在確定動力學陷阱的存在會限制蛋白質的折疊速率和產量的一項研究中。
包裝：1, 10 g in glass bottle、100, 500 mg in glass bottle
生化/生理作用：胰蛋白酶切割賴氨酸和精氨酸殘基的 C 端肽。 如果酸性殘基位于切割位點的任一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側，則停止水解。 胰蛋白酶活性的最適 pH 為 7-9。 胰蛋白酶還可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵的作用。 將 EDTA 作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和鈣離子和鎂離子，這些離子遮蔽胰蛋白酶作用的肽鍵。 去除這些離子會增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，將抑制胰蛋白酶。
組分：胰蛋白酶由 223 個氨基酸殘基的單鏈多肽組成，通過從胰蛋白酶原去除 N-末端六肽而產生，胰蛋白酶原在 Lys-1le 肽鍵處被切割。 氨基酸序列通過 6 個二硫鍵交聯。 這是胰蛋白酶，beta-胰蛋白酶的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可以自溶，在 Lys-Ser 殘基位點切割，產生 α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。
注意：1mM HCl 溶液以等分試樣可穩定保存 1 年，儲存于 -20℃。Ca2+ 的存在也會減少胰蛋白酶的自溶，并維持其在溶液中的穩定性。 在 2.0M 尿素，2.0M 鹽酸胍或 0.1％（w/v）SDS 溶液中，胰蛋白酶也將保留其大部分活性。
單位定義：使用 BAEE 作為底物，一個 BAEE 單元，將在 pH 7.6，25℃ 下，每分鐘產生 0.001 的 A253。
制備說明：溶于 1 mM HCl，濃度為 1 mg/mL。
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