Sigma試劑:藥典重組胰蛋白酶,T8802-50MG
屬性：
質量水平：200
無菌性：aseptically filled
形式：essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity：≥10,000 BAEE units/mg protein
分子量：23.8 kDa
組成：protein, ≥95%
溶解性：hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
異質活性：Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
儲存溫度：?20°C
一般描述：
胰蛋白酶分子有兩個結構域：一個與酶活性位點和色氨酸殘基有關；另一個與8-苯胺基萘-1-磺酸鹽結合有關。
應用：
對于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用約為 1：100 至 1:20 的比例。從培養表面除去粘附細胞是本產品的一個典型應用。 從其底物中去除細胞所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養物的年齡。 胰蛋白酶也被用于細胞培養期間細胞的再懸浮、蛋白質組學研究中的蛋白質消化和各種凝膠內消化。 其他應用包括：通過基于膜的技術評估結晶，用在確定動力學陷阱的存在會限制蛋白質的折疊速率和產量的一項研究中。
胰蛋白酶可使貼壁細胞從組織培養板上脫落，以用于傳代。胰蛋白酶用于研究評估大分子群集對人α-乳清蛋白結構穩定性的影響。 胰蛋白酶也用于研究哈茨木霉分泌組的BN-PAGE分析。
生化/生理作用：
胰蛋白酶切割賴氨酸和精氨酸殘基的 C 端肽。 如果酸性殘基位于切割位點的任一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側，則停止水解。 胰蛋白酶活性的最適 pH 為 7-9。 胰蛋白酶還可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵的作用。 將 EDTA 作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和鈣離子和鎂離子，這些離子遮蔽胰蛋白酶作用的肽鍵。 去除這些離子會增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，將抑制胰蛋白酶。
單位定義：
在25℃、pH 7.6條件下，使用BAEE作為底物，一單位BAEE每分鐘可產生0.001的ΔA253 。反應體積= 3.2 ml（1 cm光程）。
使用 BAEE 作為底物，一個 BAEE 單元，將在 pH 7.6，25℃ 下，每分鐘產生 0.001 的 A253。
制備說明：
TPCK處理
分析說明：
E1%/280法測定蛋白
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