Sigma試劑:胰蛋白酶-EDTA 溶液,T4174-20ML
屬性:
生物來源:Porcine
質量水平:400
無菌性:sterile-filtered
產品線:BioReagent
形式:solution
分子量:23.4 kDa
濃度:10 ×
應用:cell culture | mammalian: suitable
雜質:Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)
pH值(酸堿度):7.0-7.6
運輸:dry ice
儲存溫度:?20°C
應用:
該產品的典型用途是使貼壁細胞從培養表面脫落。使細胞從附著面脫落所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養階段。
胰蛋白酶-EDTA溶液可用于以下應用:
用作細胞培養物中的補充劑,以維持細胞生長
在收獲生長至融合狀態的細胞
時,用以使慢病毒轉導的巨噬細胞脫落
生化/生理作用:
胰蛋白酶可切割賴氨酸和精氨酸殘基的C端肽。 如果酸性殘基位于切割位點的兩側,則該反應的水解速度減慢,而如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側,則不水解。 胰蛋白酶活性的最佳pH為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯鍵和酰胺鍵。 將EDTA作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中,可中和掩蓋胰蛋白酶作用肽鍵的鈣鎂離子。 去除這些離子可增加酶活性。
DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等絲氨酸蛋白酶抑制劑可抑制胰蛋白酶。
組分
胰蛋白酶由含有223個氨基酸殘基的單鏈多肽組成,由胰蛋白酶原在Lys - lle肽鍵處切去N-端六肽而得。 這些氨基酸序列通過6個二硫鍵交聯。 這就是胰蛋白酶(即β-胰蛋白酶)的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可自溶,在Lys-Ser殘基裂解,產生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。
注意
本品應置于-10至-40°C環境冷凍儲存。避免反復凍融。
制備說明
用濃度過高的胰蛋白酶長時間孵育細胞會破壞細胞膜并殺死細胞。 溶解胰蛋白酶或由濃溶液稀釋應使用不含Ca2+ 或Mg2+的緩沖鹽溶液。
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主營產品:
試劑盒:ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、細胞凋亡試劑盒
細胞培養:血清,培養基、胰酶、雙抗等
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生化試劑:進口原裝生化試劑、國產生化試劑
抗體:進口、國產原裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等
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