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Sigma:間質膠原酶IA,C9891-25MG

Sigma:間質膠原酶IA,C9891-25MG

簡要描述:
Sigma:間質膠原酶IA,C9891-25MG,CAS: 9001-12-1
屬性:
質量水平:200
形式:essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity:≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量:68-130 kDa
溶解性:TESCA buffer (5

更新時間:2023-05-17

訪問量:574

廠商性質:代理商

產品品牌:sigma

Sigma:間質膠原酶IA,C9891-25MG,CAS: 9001-12-1

屬性

質量水平200

形式essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量68-130 kDa

溶解性TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble

特色行業Diagnostic Assay Manufacturing

運輸wet ice

儲存溫度?20°C

應用

該酶還與其他蛋白酶一起被用于分解人類腫瘤、小鼠腎臟、人腦和肺上皮組織。它還在在肝、腎灌注研究、胰腺消化、非實質大鼠肝細胞和肝細胞分離等方面有應用價值。Sigma的該酶用于牛小梁和皮質骨I型膠原的消化。它也被用作B 鏈球菌 細胞FALGPA檢測的陽性對照。

生化/生理作用

從組織中有效釋放細胞需要膠原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩爾膠原酶由4g原子鈣(Ca2+) 酶激活。培養濾液被認為含有分子量在68-130 kDa之間的至少7種不同的蛋白酶。最佳pH范圍為6.3-8.8。這種酶通常用于消化組織樣本中的結締組織成分,以釋放單個細胞。膠原酶治療會導致一些細胞死亡。通常,消化濃度從0.15 mg/mL不等。為產生令人滿意的細胞解離效率并不會造成太多的細胞死亡,其反應時間從15分鐘到幾個小時不等。最好使用含有鈣和BSAKrebs Ringer緩沖液,Zn2+ 是活性必需的。該酶識別序列 -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-,其中X通常是中性氨基酸。乙二醇雙(β-氨基乙基醚)-N,N,N′,N′-四乙酸(EGTA)4;β-巰基乙醇;谷胱甘肽(還原型));巰基乙酸鈉;2、2′-聯吡啶;8-羥基喹啉、半胱氨酸具有抑制該酶活性的作用。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

注意

所提供產品可在-20℃穩定保存一年。在37℃、50℃-20℃保存30天,無明顯的FALGPA和蛋白酶活性損失。如果快速冷凍分裝液(10 mg/mL)并保存于-20℃,膠原蛋白酶原液活性穩定。反復凍融會破壞溶液。 本品在冰上置放7小時以上可保留100%活性。

單位定義

一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白,產生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時,pH7.5,37℃下產生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

制備說明

該產品相當于Mandl,I.,等報道的前40%硫酸銨餾分。(Mandl, I., et al., J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).儲備溶液制備可在37°C下,將1-2 mg/mL膠原酶溶解于含有TESCA緩沖液(含50mM TES,0.36mM氯化鈣,pH 7.4.


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