Sigma:間質膠原酶,C9722-50MG,CAS: 9001-12-1
屬性:
質量水平:200
生物來源:Clostridium histolyticum
無菌性:sterile-filtered
形式:lyophilized powder (from sterile-filtered solution)
specific activity:0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
濃度:1 mg/mL
應用:cell culture | mammalian: suitable
pH值(酸堿度):7.4
運輸:ambient
儲存溫度:?20°C
應用:
該產品適用于人體腫瘤、小鼠腎臟、成人和胎兒大腦、肺和許多其他上皮組織的解聚。在肝臟和腎臟灌注研究、胰腺消化、分離非實質大鼠肝細胞和肝細胞制備中也顯示有效。膠原酶還用于動脈組織的制備,用于研究晚期糖基化終產物。已檢測了濃度約為 1 mg/mL 的該酶對肝細胞的釋放。消化濃度范圍為 0.1 至 5 mg/mL。
生化/生理作用:
膠原酶產品是由溶組織梭菌分泌的一種混合酶 ,根據分泌的酶中 10-18 組分的相對比例而區分不同的產品。主要成分為兩種膠原酶— 梭菌蛋白酶和一種中性蛋白酶。這些酶的協同操作降解膠原和胞內其他物質。膠原酶和中性蛋白酶的作用是使細胞有效地從組織中釋放出來所必需的。各種類型的膠原是膠原酶的天然底物。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
注意:
供應時,本品在-20℃ 下可穩定保存一年。在 37°C、50°C 和-20°C 條件下儲存 30 天后,FALGPA 或蛋白酶活性未損失。如果快速冷凍 (10 mg/mL) 并在-20°C 下冷凍,粗膠原酶溶液是穩定的。進一步凍融循環將破壞溶液。置于冰上 7 小時后,產品仍保持 100% 活性。
單位定義:
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白,產生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時,pH7.5,37℃下產生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明:
通常在 37°C 下用含 50 mM TES、0.36 mM 氯化鈣 (pH 值為 7.4) 的 TESCA 緩沖液制備 1-2 mg/mL 溶液。本品還含有梭菌蛋白酶、非特異性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
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