Sigma:間質膠原酶IV,C1889-50MG,CAS: 9001-12-1
屬性：
質量水平：200
無菌性：sterile-filtered
形式：powder
specific activity：≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量：68-130 kDa
適用性：release of physiologically active rat hepatocytes tested
特色行業：Diagnostic Assay Manufacturing
儲存溫度：?20°C
一般描述：
溶組織梭菌含有兩種膠原酶，可剪切膠原酶三螺旋不同的切割位點。切割效率比哺乳動物膠原酶更高。梭菌膠原酶與氣性壞疽的細菌侵襲有關。
應用：
膠原酶已被用于制備動脈組織，用于研究晚期糖基化終產物（AGE）。該酶還與其他蛋白酶一起用于人腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮和許多其他組織的解聚。它在肝臟和腎臟灌注研究，胰腺消化和非實質肝細胞的分離中也是有效的。當測試該酶是否適合釋放肝細胞時。對于每只大鼠肝臟，膠原酶以約 1mg/mL 使用，總體積為 100mL。
膠原酶（源于溶組織梭菌）用于解離組織樣本，如脾臟和睪丸組織。
生化/生理作用：
從組織中有效釋放細胞需要膠原酶和中性蛋白酶的作用。膠原酶被每克摩爾酶 4 克原子鈣（Ca2+）活化。培養濾液被認為含有至少 7 種不同的蛋白酶，分子量范圍為 68-130 kDa（最適 pH 值：6.3-8.8）。該酶通常用于消化組織樣品中的結締組分以釋放單個細胞。膠原酶治療可導致一些細胞死亡。通常，用于消化的濃度為 0.1 至 5mg/mL。反應持續時間從 15 分鐘到幾小時不等，這使得能夠有效地解離細胞而不會導致過多的細胞死亡。具有鈣和 BSA 的 Krebs Ringer 緩沖液是優選的，并且 Zn2+ 是其活性所必需的。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
注意：
根據提供，該產品在 -20°C 下，可穩定保存一年。在 37℃、50℃ 和 -20℃ 下，30 天內 FALGPA 或蛋白酶活性沒有損失。如果以等分試樣（10mg/mL）快速冷凍，并且在 -20℃ 下冷凍，則粗膠原酶的溶液是穩定的。進一步的凍融循環會損壞溶液。 當在冰上保持時，該產品在 7 小時內保持 100％ 活性。
單位定義：
一個膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸，5小時，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白，產生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時，pH7.5,37℃下產生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明：
從 IV 型（C5138）制備?？梢酝ㄟ^在 37℃ 下，將 0.05-0.1mg/mL 膠原酶溶解在含有 0.36mM 氯化鈣（TESCA）（pH 7.4）的 50mM TES 緩沖液中來制備儲備溶液。該產品還含有梭菌蛋白酶，非特異性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
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