Sigma:C2399-1.5KU,間質膠原酶VII,cas:C2399-1.5KU
屬性:
質量水平:200
無菌性:sterile-filtered
形式:lyophilized powder
specific activity:≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
純化方式:chromatography
溶解性:TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C
儲存溫度:?20°C
應用:
膠原酶已用于動脈組織的制備,用于晚期糖基化終產物 (AGE) 的研究。該酶還與其他蛋白酶一起使用,用于人體腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮等多種組織的解聚。在肝臟和腎臟灌注研究、胰腺的消化和非實質肝細胞的分離中也有效。
來自組織溶梭菌的膠原酶已被用于:
1.誘發小鼠腦出血(ICH)
2.消化3D膠原蛋白凝膠以進行免疫熒光分析
3.引起小鼠局灶性血液外滲和出血
生化/生理作用:
有效地從組織中釋放細胞需要膠原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩爾酶用 4 克原子鈣 (Ca2+) 激活膠原酶。一般認為培養濾液至少含有 7 種不同的蛋白酶,分子量范圍為 68-130 kDa(zui適用 pH:6.3-8.8)。該酶識別序列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-,其中 X 是最常見的中性氨基酸。
組織溶梭菌包含兩類膠原酶。梭菌膠原酶比哺乳動物膠原酶更高效。它在膠原三螺旋中的多個裂解位點進行裂解。梭菌膠原酶可參與氣體壞疽中的細菌入侵。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
單位定義:
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白,產生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時,pH7.5,37℃下產生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明
由 VII (C0773) 型制備。在 37℃ 下,將 0.05-0.1 mg 膠原酶溶于 1 mL 含 0.36 mM 氯化鈣 (TESCA) 的 50 mM TES 緩沖液 (pH 7.4) 中,制備貯備液。
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