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酶elisa試劑盒的基本原理
發布時間： 2022-11-14 點擊次數： 660次酶elisa試劑盒的基本原理盒一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物，它可以催化底物分子發生反應，產生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。ELISA的基本原理有三條：?。?）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；?。?）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；?。?）酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。ELISA樣本的處理：酶elisa試劑盒的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據，為了保證實驗數據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面的質量控制和全過程質量控制，在收集標本前都必須有一個完整的計劃注意事項：1、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類，如果要做復孔，標本量收集體積=100ulx檢測種類x2；2、樣本收集后若在一周內進行檢測可保存于2-8°C，若不及時檢測，請進行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復凍融3、試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍，建議實驗前通過相關文獻預估樣本中待測物的濃度并通過預實驗確定樣本；4、血清標本采集是應注意避免溶血，紅細胞溶解是會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，溶血標本可能會增加非特異性顯色；5、為了保證尿液檢測的準確性，必須正確收集尿液標本和保存，收集尿液的容器必須要清潔干燥，最好使用一次性的容器，避免因用藥并清潔不到而造成的污染，尿液樣本必須新鮮，留取后，應及時檢測或保存；6、標本宜在新鮮是檢測如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其中可能發生聚合，間接法ELISA中樂視本底加深；7、反復凍融會使蛋白效價降低，所以待測樣本如需多次檢測，宜少量分裝凍存。- 下一篇：吐溫80增溶劑的用法及用量分析
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