小鼠elisa kit試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中小鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)的含量。
實驗原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并進行洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
優勢:
靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質的低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
特異性:常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應,使測定結果升高,可能導致假陽性,所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
精度:ELISA試劑一般指其批內CV%,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍。
準確度:通過添加回收實驗進行評價。
簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結果判斷簡單明了,定量試驗結果計算也應簡單。
安全性:指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
經濟性:試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本,而市場價格比較合理。