培養基采用化學成分未知或不全知的天然有機營養物質配制而成。常用的天然有機營養物質有馬鈴薯、小麥、大豆粉、高粱粉、薯類、胡蘿卜、米糠、麩皮、各種秸稈、木屑、甘蔗渣、棉籽殼、豆腐渣、酒糟、禽畜糞等。其營養齊全,取材容易,價格低廉,配制方便,是培養菌種和栽培生產理想的產品。配制時宜采用新鮮的材料,秸稈要切短,殼粒需粉碎。
影響滅菌的因素很多,除了雜菌的種類和數量、滅菌溫度和時間長度外,還取決于:
1、營養物質的維持
當微生物在濕熱滅菌中被殺死時,營養成分也受到一定程度的破壞,尤其是氨基酸和維生素。比如在121℃下僅20分鐘,59%的賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸被破壞,還有相當數量的蛋氨酸和色氨酸也被破壞。在熱量的作用下,一些營養物質可能會因熱量而相互反應,導致原有的營養物質發生變化,從而影響質量。
2.微生物的耐熱性
細菌孢子熱阻大,滅菌所需時間取決于將細菌孢子減少到規定數量所需的時間。
3.pH值
pH值對微生物的耐熱性影響很大。當pH值在6.0-8.0之間時,微生物死亡的可能性小。酸堿度越低,所需的時間越短。
4.顆粒
小顆粒容易殺菌,大顆粒難殺菌。含有少量較大顆粒和粗纖維的介質可以通過粗過濾去除(這不應影響介質的質量)。結塊會導致滅菌不*。
5.泡沫
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進去,殺死雜菌。
現代細胞培養基通常包含70至100種成分,數百種成分的選擇以及每種成分都可以從多種渠道來源獲得。這導致了錯綜復雜的供應商網絡和可能的變異性??紤]到這種復雜性,我們還需要從不同角度對培養基生產穩定性進行控制,并完善供應管理網絡。